GENOTIPAGEM POR ENRIQUECIMENTO E CAPTURA DIRECIONADA DE GENES CANDIDATOS EM Coffea canephora

Sinara Oliveira de Aquino, Rémi Tournebize, Pierre Marraccini, Cédric Mariac, Marie Couderc, Kevin Bethune, Philippe Cubry, Alan Carvalho Andrade, Olivier Darracq, Maud Lepelley, Dominique Crouzillat, Catherine Kiwuka, Niels Anten, Stéphanie Manel, Olivier François, Yves Vigouroux, Alexandre Kochko, Valérie Valérie

Resumo


A captura direcionada de sequências acoplada ao sequenciamento de alto rendimento tornou-se um método poderoso para o estudo da variação de sequências genômicas. Usando o genoma disponível de C. canephora (tamanho estimado de 710 Mb/haplóide) como referência, projetamos sondas para 323 genes candidatos selecionados (CGs) visando capturar seus homeólogos em 293 acessos de C. canephora da Uganda, 12 clones do Brasil e um subconjunto de 19 indivíduos cobrindo todos os grupos de diversidade de C. canephora. Para um total de 324 indivíduos de C. canephora, projetamos, com sucesso, cerca de 19.000 sondas e identificamos mais de 16.000 polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) de qualidade, localizados dentro ou próximo a 318 genes anotados, gerando dados genotípicos para populações que estão localizadas em regiões que abrangem diferentes condições climáticas. Nós investigamos questões como desenho das sondas, cobertura do sequenciamento, eficiência da hibridização e captura, e estratégias de análise dos dados por bioinformática.


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